裸鼠蛋白磷酸酶(pp)elisa試劑盒洗滌方法:
1. 自動洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入detection ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
干4.每孔加hrp conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(od值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
atg9b自噬相關(guān)蛋白9b抗體
apg12自噬相關(guān)蛋白12抗體
atg13自噬相關(guān)蛋白13抗體
atg3自噬相關(guān)蛋白3抗體
phospho-atf2 (ser490/498)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-amyloid precursor protein (tyr757)磷酸化app(tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體
adam18去整合素樣金屬蛋白酶18抗體
atf6活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體
ap2 beta銜接蛋白β抗體
gamma-adaptin銜接蛋白γ/γ-adaptin抗體
aqp9水通道蛋白-9抗體
annexin a3膜粘連蛋白a3抗體
annexin iv膜粘連蛋白 a4抗體
apg8a自噬相關(guān)蛋白8a抗體
phospho-akt (thr450)磷酸化蛋白激酶b抗體
phospho-ampk alpha-1 (thr198)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
phospho-akt(thr308)磷酸化蛋白激酶b抗體
apobec3g脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體
akap13蛋白激酶錨定蛋白13抗體