香蘭素（vanillin），又名，是一種廣泛使用的可食用香料或醫(yī)藥中間體，可采取內(nèi)標(biāo)法測(cè)定奶茶中香蘭素的含量。
使用內(nèi)標(biāo)法時(shí)，在樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它可被色譜柱所分離，又不受試樣中其它組分峰的干擾，只要測(cè)定內(nèi)標(biāo)物和待測(cè)組分的峰面積與相對(duì)響應(yīng)值，即可求出待測(cè)組分在樣品中的百分含量。內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個(gè)能得到純樣的己知化合物，和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì)(如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應(yīng)特征，是被分析物質(zhì)的一個(gè)同系物。當(dāng)然，內(nèi)標(biāo)物必須能與樣品中各組分充分分離并不發(fā)生反應(yīng)。
方法所需儀器與試劑：氣相色譜儀，10ul進(jìn)樣針，移液槍；
香蘭素儲(chǔ)備樣（稱取香蘭素0.5022g，以氯仿定容到50ml容量瓶）；
2-甲氧基儲(chǔ)備樣（稱取2-甲氧基0.4987g，以氯仿定容到50ml容量瓶）；
香蘭素未知樣，氯仿。
測(cè)定方法：
配置標(biāo)準(zhǔn)溶液：以移液槍量取100，200，300，400ul香蘭素儲(chǔ)備液和200，200，200，200ul2-甲氧基儲(chǔ)備液于5ml容量瓶中，用氯仿定容。
配置未知溶液：以移液槍量取200ul香蘭素未知液和200ul2-甲氧基儲(chǔ)備液于5ml容量瓶中，用氯仿定容。
氣相色譜條件：進(jìn)樣口：氣化溫度：250℃，分流比：10:1；
色譜柱：流速：2.0ml/min;
柱溫箱：120℃（保持1min），10℃/min升到200℃
檢測(cè)器：基座溫度：250℃，h2：45ml/min,
air:450ml/min,n2:40ml/min.保存。
以以上方法測(cè)定標(biāo)樣及未知樣，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（保留時(shí)間及峰面積），做出內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線，以內(nèi)標(biāo)法計(jì)算未知樣中香蘭素含量。
關(guān)鍵詞：色譜柱 氣相色譜儀 移液槍 柱溫箱