“蛋白同化制劑”又稱同化激素，俗稱合成類固醇（anabolicsteroids，as），是合成代謝類藥物，具有促進蛋白質(zhì)合成和減少氨基酸分解的特征，可促進肌肉增生，提高動作力度和增強男性的性特征。但如果出于非醫(yī)療目的而使用(濫用)此類藥物則會導致生理、心理的不良后果，因此世界（wada）把as列入禁用物質(zhì)名單。然而，as檢測難度很大，不僅要定量as的濃度，還要盡可能多的篩出這些禁用物質(zhì)，而涵蓋的禁用物質(zhì)結(jié)構(gòu)各異，化學性質(zhì)差異較大，濃度線性范圍也寬，使得分析更加困難。
tsq 8000 evo具備快速碰撞池技術(shù)，結(jié)合timed-srm掃描方式，可在35min內(nèi)實現(xiàn)5496個離子對的同時采集分析，高達七個數(shù)量級的寬線形范圍為離子檢測系統(tǒng)，而方法學指標基本不受影響。tracefinder工作站具有非常強大的qaqc功能，通過對保留時間、定量/性離子對及離子對比率等關(guān)鍵定性指標及相關(guān)輔助定量指標設(shè)置閾值，貼心的flag功能通過不同顏色直觀的顯示是否符合要求。由此，分析人員可從大量組分或者大量樣品中，快速篩查出可疑的陽性組分或者陽性樣品。
【實驗/設(shè)備條件】
部分srm離子對信息如下：
【實驗/操作方法】
本文利用tsq 8000 evo三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀，結(jié)合tracefinder工作站，建立了高通量篩查分析的一般工作流程。
【實驗結(jié)果/結(jié)論】
1.方法建立
賽默飛擁有共計124個藥物及其代謝物srm參數(shù)數(shù)據(jù)庫，每種化合物均包括保留時間、離子對及碰撞能等信息。只需從數(shù)據(jù)庫中挑選要做的組分，直接導入到采集方法中，即可完成方法建立。當然，如果數(shù)據(jù)庫中全部化合物都導入到方法里，則可實現(xiàn)該范圍內(nèi)的篩查分析。timed-srm掃描功能可大大提高保留時間漂移的容忍度。
圖1.賽默飛124種化合物的數(shù)據(jù)庫
2.篩查閾值設(shè)置
多組分篩查分析時，一般是依據(jù)化合物保留時間、定量/性離子對、離子對比率進行判斷是否檢出。tracefinder工作站可以對其進行設(shè)置，如下：
圖2.相關(guān)篩查閾值設(shè)置
關(guān)于離子對比率計算方法，軟件提供了manual、average、weighted average及l(fā)evel四種計算方式，可根據(jù)實際情況進行選擇。關(guān)于離子對比率允差設(shè)置，軟件提供了relativeabsolute兩種計算方式及允差范圍設(shè)置，可根據(jù)實際情況進行選擇。
任何一項超出設(shè)置范圍，tracefinder工作站會通過相應(yīng)的flag顯示。詳見2、4部分。
3.qaqc閾值設(shè)置
在定量分析中，可以選擇性的設(shè)置一些閾值，使軟件按照閾值自動判斷諸如標準曲線、定量結(jié)果等數(shù)據(jù)的質(zhì)量，從而節(jié)省時間和精力。任何一項超出設(shè)置范圍，tracefinder工作站會通過相應(yīng)的flag顯示。詳見4部分。
圖3.部分qaqc功能
4.flag設(shè)置
2、3部分簡單的介紹了在篩查分析及日常定量分析中，tracefinder工作站能夠給分析人員提供的一些必要判斷標準的選擇。tracefinder工作站允許分析人員根據(jù)實際需要對這些閾值規(guī)則進行修改并選擇不同形式的flag顯示。具體設(shè)置界面如圖4。
本文中，為了描述方便，僅對confirming ions coelution、ion ratio failure、nf（peak not found）等設(shè)定了相應(yīng)的flag。軟件會自動幫分析人員快速的進行判斷篩選，終通過flag形式顯示出來。由圖 7 的一系列圖可以直觀的看出，有 29 種組分未檢出，95 種組分確認檢出。
當目標組分數(shù)目少于樣品數(shù)目時，采用compound view功能查看，可以快速的進行不同樣品間比較。見圖8。也可以同時結(jié)合色譜峰進行比較查看，見圖9。
圖4. flag設(shè)置界面
圖7. flag顯示結(jié)果
圖8. compound view功能
圖9.色譜峰視圖
結(jié)論
通過介紹tracefinder工作站的強大功能，建立了快速篩利用功能強大的tracefinder工作站，結(jié)合tsq 8000 evo出色的性能，可顯著提高篩查及高通量分析的效率。tsq8000 evo能夠在保證良好的方法學指標基礎(chǔ)上，29.5 min內(nèi)完成數(shù)據(jù)庫里所有化合物的同時分析。在此基礎(chǔ)上，tracefinder工作站可以預先設(shè)置相關(guān)的閾值，通過flag功能直觀顯示出來，輔助分析人員快速的進行篩選判斷。
【儀器/耗材清單】
賽默飛tsq 8000 evo三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀、tracefinder工作站