reveal®2.0沙門氏菌檢測系統(tǒng)
不用時將檢測條儲存在15-30oc，將干粉培養(yǎng)基儲存在室溫下（15-30oc）
主要用途
reveal®沙門氏菌檢測系統(tǒng)可用于快速鑒定食品及，物飼料和環(huán)境樣品中沙門氏菌，完成對沙門氏菌的檢測和初步鑒別只需要24小時。
測試原理
本系統(tǒng)利用revive培養(yǎng)基，它能夠為沙門氏菌提供易利用的營養(yǎng)成分，以及其它對受脅迫或損傷狀態(tài)下的沙門氏菌進(jìn)行恢復(fù)的必要因子。用revive培養(yǎng)后，選擇性富集培養(yǎng)可使沙門氏菌生長到能夠被reveal檢測條檢出的水平。reveal檢測詳述如下:
對于一些樣品，初的非選擇性培養(yǎng)可以饒過，直接將樣品引進(jìn)到rv培養(yǎng)基中。
對于那些非常黏稠，含色素，或者包含水平無法生活細(xì)胞的樣品，可選擇的第三種富集方法能夠檢測到其含有的沙門氏菌。在食品工業(yè)中，使用m肉湯培養(yǎng)是幾種*的確定標(biāo)準(zhǔn)程序中的好選擇。
將少量富集培養(yǎng)物（120μl）放到樣品杯中，將檢測條浸入到樣品并在環(huán)境溫度下保持15分鐘。樣品通過毛細(xì)管作用滲過含特異性沙門氏菌抗體（與膠體金顆粒相偶聯(lián)）的試劑區(qū)。如果樣品中存在抗原（即沙門氏菌），它將與膠體金標(biāo)記的抗體結(jié)合。該抗原-抗體復(fù)合物滲過試劑區(qū)，經(jīng)過含有沙門氏菌抗體（分布呈帶狀）的硝化纖維膜。該含金免疫復(fù)合物被捕獲并聚集在這個區(qū)域，從而顯示一條可見的線。剩余的樣品繼續(xù)遷移而進(jìn)入位于膜末端的廢液貯存處。
試劑區(qū)也含有針對廣譜抗原的金復(fù)合物（指示劑），無論沙門氏菌存在與否，它都會被樣品溶液釋放。膠體金復(fù)合物對照指示劑通過膜遷移到陰性對照捕獲區(qū)（含針對廣譜抗原的抗體區(qū)），捕獲并集結(jié)成一條可見線。無論沙門氏菌抗原存在與否，都會在質(zhì)控區(qū)形成對照線，以保證檢測過程操作正確無誤。
主要使用者
reveal 2.0沙門氏菌測試系統(tǒng)旨為熟悉沙門氏菌分離與鑒定中無菌操作技術(shù)的人員而設(shè)計的。建議不具備微生物基礎(chǔ)知識的使用者參加neogen公司的技能培訓(xùn)。
提供的材料
reveal檢測條
20個沙門氏菌檢測條
20個移液管
20個反應(yīng)杯
revive培養(yǎng)基
20瓶revive培養(yǎng)基
20個培養(yǎng)袋
量杯
二次選擇性培養(yǎng)基
20裝2倍濃縮的rv培養(yǎng)基（2×rv）
20個培養(yǎng)袋
量杯
直接選擇培養(yǎng)基
20瓶1×rv培養(yǎng)基
20個培養(yǎng)袋
量杯
試劑盒不提供的必需品
天平（小刻度25g）
計時器
樣品杯架
無菌水
能保持36oc及42oc的培養(yǎng)箱
可選擇的設(shè)備
reveal accuscanⅲ 讀數(shù)儀器
均質(zhì)器
儲藏
不用時，檢測條應(yīng)儲存于15-30℃；干粉培養(yǎng)基儲存在室溫下（15-30℃）。
不同物品的檢測
本產(chǎn)品可有效地用于許多物品中沙門氏菌的檢測。還可從neogen公司獲得，本產(chǎn)品進(jìn)行沙門氏菌檢測的物品明細(xì)表，同時備有對于不同物品檢測時*的富集方法。
警惕
1 不要使用過期的培養(yǎng)基
2 打開裝檢測條的瓶子前，讓檢測條升至室溫
3 使用水化培養(yǎng)基須在6小時內(nèi)準(zhǔn)備
4 培養(yǎng)時間和溫度尤為重要，否則會導(dǎo)致錯誤結(jié)果
5 在培養(yǎng)過程中樣品袋不能扎得過緊，以便于空氣交換；這對沙門氏菌生長及抗原表達(dá)至關(guān)重要
6 水化revive培養(yǎng)基時無菌水應(yīng)該升至42oc，水化rv培養(yǎng)基時無菌水應(yīng)是36oc
7 選擇性富集的培養(yǎng)物的檢測應(yīng)在培養(yǎng)后的6小時內(nèi)完成
8采用良好微生物實驗室操作規(guī)程
1 樣品準(zhǔn)備及預(yù)培養(yǎng)
樣品富集1—適用于大多數(shù)食品和環(huán)境樣品
1 將1瓶revive培養(yǎng)基（9705）或者7.2g大瓶裝的revive培養(yǎng)基（9708）倒入培養(yǎng)袋中，加入200ml預(yù)熱至42℃的無菌水，抓牢袋子離頂部2-3英寸處并用力混勻，直到溶解；
2 將25g樣品（樣品的溫度必須與室溫一致）加到含有revive培養(yǎng)基的培養(yǎng)袋中，抓緊袋子并使樣品混勻，用一邊到另一邊的方式劇烈晃動袋子，使確保*混勻；參考辦法：將袋子放到均質(zhì)器內(nèi)，用正常速度下混勻30秒鐘。
3 松散地緊閉袋子（見“警惕”第5步），放進(jìn)合適的架子或支撐物，36±1℃培養(yǎng)4小時
4將1瓶濃縮的2×rv培養(yǎng)基（9715）或者10.6g大瓶裝的rv培養(yǎng)基（9716）倒入培養(yǎng)袋中，加入200ml預(yù)熱至36℃的無菌水，抓牢袋子離頂部2-3英寸處并用力混勻，直到溶解,在使用前保持在42℃
5將revive培養(yǎng)袋子從36℃的溫箱取出放到合適的架子或支撐物上
6向樣品袋內(nèi)（共200ml）加入200ml預(yù)熱到42℃的預(yù)先制備的選擇性rv培養(yǎng)基，抓牢袋子離頂部2-3英寸處并用一邊到另一邊的方式輕輕混勻
7松散地扎上袋子口，并將其放到架子或支持物上，42oc培養(yǎng)16-24小時
樣品富集2—適用與挑選的食品，包括生的碎牛肉，生的碎家禽肉，生海鮮，家禽沖洗水
1將1瓶1×rv培養(yǎng)基（9729）或者5.3g大瓶裝的rv培養(yǎng)基（9716）倒入培養(yǎng)袋中，加入200ml預(yù)熱至42℃的無菌水，抓牢袋子離頂部2-3英寸處并用力混勻，直到溶解；
2將25g樣品（樣品的溫度必須與室溫一致）加到含有1×rv培養(yǎng)基的培養(yǎng)袋中，抓緊袋子并使樣品混勻，用一邊到另一邊的方式劇烈晃動袋子，使確保*混勻；參考辦法：將袋子放到均質(zhì)器內(nèi)，用正常速度下混勻30秒鐘。
3松散地扎上袋子口，并將其放到架子或支持物上，42oc培養(yǎng)20-24小時
樣品富集3—適用與潛在的困難樣品，包括干的寵物食品，高黏性或者高色素原料
1 將1瓶revive培養(yǎng)基（9705）或者7.2g大瓶裝的revive培養(yǎng)基（9708）倒入培養(yǎng)袋中，加入200ml預(yù)熱至42℃的無菌水，抓牢袋子離頂部2-3英寸處并用力混勻，直到溶解；
2 將25g樣品（樣品的溫度必須與室溫一致）加到含有revive培養(yǎng)基的培養(yǎng)袋中，抓緊袋子并使樣品混勻，用一邊到另一邊的方式劇烈晃動袋子，使確保*混勻；參考辦法：將袋子放到均質(zhì)器內(nèi)，用正常速度下混勻30秒鐘。
3 松散地緊閉袋子（見“警惕”第5步），放進(jìn)合適的架子或支撐物，36±1℃培養(yǎng)4小時
4將1瓶濃縮的2×rv培養(yǎng)基（9715）或者10.6g大瓶裝的rv培養(yǎng)基（9716）倒入培養(yǎng)袋中，加入200ml預(yù)熱至36℃的無菌水，抓牢袋子離頂部2-3英寸處并用力混勻，直到溶解,在使用前保持在42℃
5將revive培養(yǎng)袋子從36℃的溫箱取出放到合適的架子或支撐物上
6向樣品袋內(nèi)（共200ml）加入200ml預(yù)熱到42℃的預(yù)先制備的選擇性rv培養(yǎng)基，抓牢袋子離頂部2-3英寸處并用一邊到另一邊的方式輕輕混勻
7松散地扎上袋子口，并將其放到架子或支持物上，42oc培養(yǎng)16-24小時
8加入10ml 36℃的無菌水到1瓶m肉湯培養(yǎng)基（9722）中，握緊搖動來溶解該培養(yǎng)基
9移取1ml revive/rv的培養(yǎng)液到溶解的m-肉湯內(nèi)
10 36oc培養(yǎng)下6小時
檢測條檢測過程
1. 從培養(yǎng)箱中取出樣品袋，混勻，取200ul或者8滴到樣品杯中
2. 從裝檢測條的瓶中取出沙門氏菌檢測條
3. 將檢測條按箭頭向下端浸入到有樣品的樣品杯中，放置15分鐘
4 . 15分鐘后讀取結(jié)果
結(jié)果的解釋外觀表現(xiàn)
15分鐘內(nèi)在質(zhì)控區(qū)和檢測區(qū)都出現(xiàn)顯色線，結(jié)果為陽性；
15分鐘時只有質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)顯色線，結(jié)果為陰性；
如果質(zhì)控區(qū)沒有顯色線，則檢測無效，需要用另一個檢測條檢測；
超過20分鐘讀取結(jié)果是不正確的；
可選擇的電子解釋
根據(jù)reveal accuscan儀器說明書的操作，將檢測條放到該儀器上，觀察屏幕提示讀取并記錄結(jié)果
說明： 如果沙門氏菌存在，檢測條上的檢測區(qū)會形成一條明顯的線，線深淺的程度與沙門氏菌的血清變型或含量有關(guān)，如果出現(xiàn)明顯可見的線條，不管深淺如何，樣品都將視為陽性。
從rv培養(yǎng)基中遷移出來任何藍(lán)色到檢測條中都不影響結(jié)果。
確認(rèn)建議用reveal富集培養(yǎng)初步鑒定為陽性的樣品應(yīng)該采用bam或者blg中的涂布平板法確認(rèn)。
說明： 用bam或mlg方法檢測一個“復(fù)制”的“亞樣品”的結(jié)果并不一定與reveal檢測的結(jié)果一致！細(xì)菌并不是均勻的分布于樣品中（對于固體或干的樣品更是如此），因此，復(fù)制的亞樣品可能不含有沙門氏菌。
用品的處理
按照當(dāng)?shù)刂莼蚵?lián)邦政府實施的所有相關(guān)規(guī)定處理（高壓滅菌或漂白粉漂白等方法處理）reveal檢測裝置，移液管，培養(yǎng)基等。