對(duì)于每天泡在實(shí)驗(yàn)室的人來(lái)說(shuō),qpcr已是家常便飯。毫無(wú)疑問(wèn)濃度高,純度好,片段完整,才是我們理想中的rna樣品。然而,rna總是嬌氣的存在!室溫或4度極易降解,提取的時(shí)候容易有污染物殘留。因此完整的rna質(zhì)控包含了三個(gè)方面:濃度質(zhì)控,純度質(zhì)控,片段完整性質(zhì)控。
如何把控rna質(zhì)量,繼續(xù)反轉(zhuǎn)錄呢?
有一款rna質(zhì)控的高手,既可以提供rna濃度質(zhì)控,也可以提供rna純度質(zhì)控,沒(méi)錯(cuò),就是美國(guó)denovix公司提供的ds-11fx超微量紫外/熒光全功能分光光度計(jì),看上去酷酷的
rna純度質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)方法是超微量分光光度計(jì)(光吸收)法,通過(guò)監(jiān)控a260/230和a260/280的比值來(lái)判定rna的純度。通常a260/280的比值范圍在1.8-2.0之間,如果大于2.0則說(shuō)明rna已經(jīng)降解,如果低于1.8則說(shuō)明含有蛋白質(zhì)或其他雜質(zhì);而a260/230的比值如果小于2,則表明rna中含有酚類,鹽等雜質(zhì)。ds-11fx的微量光度計(jì)功能可以幫助科研人員來(lái)準(zhǔn)確的判定rna樣品的純度。
下圖為rna紫外法檢測(cè)示意圖,a260/280和a260/230都不在正常的比值范圍,說(shuō)明rna樣品純度很差,儀器會(huì)自動(dòng)進(jìn)行提示,兩個(gè)黃色小三角就是警示圖標(biāo)哦,點(diǎn)擊萌萌的黃色三角警示,儀器會(huì)顯示污染物的種類,夠智能吧,這就是ds-1有的smartqc功能
rna濃度質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)方法是熒光法,除非是純度很高的rna也可以采用紫外法。熒光法采用rna特異性染料,可以準(zhǔn)確的測(cè)量rna濃度。ds-11fx不但提供rna濃度質(zhì)控,也可以提供dna和蛋白的濃度精確控制,功能超級(jí)強(qiáng)大哦。