neb t4 dna連接酶(ligase)將連接以下底物：
neb t4 dna連接酶(ligase)的特性和用法：
濃度：400000個內(nèi)聚端基單位/ml和2000000個內(nèi)聚端基單位/ml
反應(yīng)條件：1x t4 dna連接酶反應(yīng)緩沖液；在16°c條件下培養(yǎng)。
1x t4 dna連接酶反應(yīng)緩沖液：50 mm tris-hcl、10 mm mgcl2、1 mm atp、10 mm dtt(ph 7.5 @ 25°c)。
貯存溶液：10 mm tris-hcl、50 mm kcl、1 mm dtt、0.1 mm edta、50% glycerol（ph 7.4 @ 25°c）。
熱失活：65℃10min。
neb t4 dna連接酶(ligase)的應(yīng)用特性：
★限制性片段的克隆
★將連接體和適配器連接到鈍端dna
neb t4 dna連接酶(ligase)使用時的注意事項：
（1）atp 是反應(yīng)中必不ke少的輔因子。這與需要 nad 作為輔因子的e. colidna 連接酶不同。
（2）若需稀釋 t4 dna 連接酶，推薦使用含 50% 甘油的貯存緩沖液（稀釋緩沖液 a，neb #b8001s）稀釋，然后于 -20℃ 貯存。如稀釋后立即使用，也可以使用 1x t4 dna 連接酶反應(yīng)緩沖液稀釋。
（3）連接反應(yīng)可以在添加 1 mm atp 的四種限制性內(nèi)切酶緩沖液的任何一種或在 t4 多聚核苷酸激酶（t4 pnk）緩沖液中進(jìn)行。
（4）為方便起見，連接可在室溫（20 - 25℃）條件下進(jìn)行。連接粘性末端，在 20 µl 反應(yīng)體系中加入 1 µl t4 dna 連接酶，反應(yīng) 10 分鐘。連接平末端，在 20 µl 的反應(yīng)體系中加入 1µl 的 t4 dna 連接酶，反應(yīng) 2 小時；或者加入 1 µl 高濃度的 t4 dna 連接酶反應(yīng) 10 分鐘。此外，也可選擇 neb quick ligation 快速連接試劑盒（#m2200s）[30 次反應(yīng)] 或（#m2200l）[150 次反應(yīng)]），在室溫條件下反應(yīng) 5 分鐘，即可完成 dna 平末端和粘性末端的連接。
neb t4 dna連接酶(ligase)產(chǎn)品訂購信息：
產(chǎn)品名稱
貨號
儲存溫度
數(shù)量
濃度
t4 dna連接酶
m0202vvial
-20℃
1 x 0.025 ml
400,000 units/ml
t4 dna連接酶反應(yīng)緩沖液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
t4 dna連接酶
m0202svial
-20℃
1 x 0.05 ml
400,000 units/ml
t4 dna連接酶反應(yīng)緩沖液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
t4 dna連接酶
m0202tvial
-20℃
1 x 0.01 ml
2,000,000 units/ml
t4 dna連接酶反應(yīng)緩沖液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
t4 dna連接酶
m0202lvial
-20℃
1 x 0.25 ml
400,000 units/ml
t4 dna連接酶反應(yīng)緩沖液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
t4 dna連接酶
m0202mvial
-20℃
1 x 0.05 ml
2,000,000 units/ml
t4 dna連接酶反應(yīng)緩沖液
b0202svial
-20℃
1 x 1 ml
10 x
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