總砷測定的樣品前處理方法
砷作為一種有du有hai元素， 普遍存在于自然界中。 近年來，隨著環(huán)境的嚴重污染，含砷農藥的使用， 動物生長過程攝入含砷飼料以及食物在加工、運輸過程中的污染， 使得總砷含量的檢測已經成為食品安全重點監(jiān)測的項目之一。 目前，現行 gb/t 5009.11-2003《食品中總砷及無機砷的測定》[1]規(guī)定總砷的測定方法主要有氫化物原子熒光光譜法、銀 鹽法、硼氫化物還原比色法、砷斑法。 其中原子熒光
法由于其靈敏度高、投入成本低且容易操作，在我國已 被廣泛運用。 當前，針對元素類物質的檢測，通常采用的前處理方法包括濕法消解、干灰化法、微波消解法和 高壓消解法， 由于考慮到所有種類食品的普遍適用性， gb/t5009.11-2003中只有前兩種前處理方法。 肉及肉制品中， 由于其砷存在形態(tài)簡單， 除可使用濕法消解、干灰化法外，還可使用微波消解法和高壓消解法。本文選用標準物質中心雞肉粉質控樣作為檢測樣品， 使用 4 種前處理方法測定總砷含量，分析比較各自的準確度、精密度、試劑及時間消耗量，并作初步探討，以便篩選出適宜的前處理方法。
測量條件
采用 afs-9700型雙道原子熒光光度計進行測量， 其測量條件為：負高壓 280v，燈電流 60ma，原子化器
高度 8.0mm，讀數時間 16s，延遲時間 4s，載氣流量
400ml/min，屏蔽氣流量 900ml/min。 采用儀器自動稀釋功能， 分別測定 0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、
8.0 和 10.0 μg/l 7 個點的熒光值， 建立熒光強度與濃度相關性的標準曲線。
1.1.1樣品前處理
2.2.3.1干灰化法[1]
稱取約 0.6000g樣品于 100ml坩堝中，同時做2份試劑空白。 向坩堝中分別加入 10ml150g/l硝酸鎂溶液，混勻，低熱蒸干；再準確稱取 1g氧化鎂仔細覆蓋在樣品上，于加熱板上炭化至無煙，移入馬弗爐中，550℃高溫灰化； 取出放冷， 小心加入 10ml 50%鹽酸（v/v）以中和氧化鎂并溶解灰分， 用去離子水多次潤洗坩堝并移入 25ml比色管中， 向其中加入 5ml硫脲-抗壞血酸混合液以及 2ml50%鹽酸
（v/v），再用去離子水定容至 25ml，混勻， 室溫還原
30 min 后備用。
2.2.3.2濕法消解[1]
稱約 0.3000g樣品于 100ml的燒杯中，同時做兩份試劑空白。 向燒杯中分別加硝酸 15ml、硫酸1 ml，搖勻后在瓶口上蓋上表面皿，靜置過夜；次日于電熱板上加熱消解， 注意觀察溶液顏色變化， 注意避免炭化，顏色若加深，冷卻后補加入硝酸 10ml， 如此反復2-3次，直至消解液較清；冷卻后，補加硝酸 10ml、
高氯酸 2ml，繼續(xù)加熱，持續(xù)蒸發(fā)至白煙散盡，液體變
為無色，剩余 1-2ml；冷卻，加去離子水 20ml，再蒸發(fā)
至冒白煙；冷卻后，用去離子水將消解樣品轉移到 25 ml 比色管中，并多次潤洗，再向其中加入 5 ml 硫脲-抗壞血酸混合液，用去離子水定容至 25 ml，混勻，室溫還原 30 min 后備用。
2.2.3.3微波消解
取約 0.3000g樣品于微波消解儀內管中， 同時做兩份試劑空白。 向內管中分別加入 7ml硝酸，靜置過夜進行冷預消解后，再加入 2ml過氧化氫，于微波消解儀中消解*； 冷卻后取出， 于趕酸板上趕酸至 1 ml左右， 用去離子水將消解樣品移入 10ml比色管中，并多次潤洗，加入 2ml硫脲-抗壞血酸混合液，用去離子水定容至 10ml，混勻，還原 30min后備用。 微波消解儀設置的消解程序見表 1。
表1 微波消解程序
步驟 程序 功率（w） 溫度（℃） 時間（m：s）
1
功率升高速度
800
-
10：00
2
保持功率
800
-
5：00
3
功率升高速度
1 400
-
10：00
4
保持功率
1 400
-
35：00
5
冷卻
-
70
-
2.2.3.1高壓消解
取約 0.3000 g 樣品于高壓消解罐內杯中， 同時做兩份試劑空白。 向內杯中分別加入 7 ml 硝酸靜置過夜進行冷預消解后，再加入 2 ml 過氧化氫；擰緊外罐后，置于干燥箱中加熱：當溫度升至 100 ℃時
保溫 1 h，再升至 140 ℃保溫 3 h；消解結束冷卻后， 打開內杯，置于趕酸板上趕酸至 2 ml 左右，用去離子水將消解樣品移入 25 ml 比色管中，并多次潤洗， 加入 5 ml 硫脲-抗壞血酸混合液，用去離子水定容至 25 ml，混勻，還原 30 min 后備用。
3結果與分析
3.1前處理方法對測定結果準確度的影響
3種消解方法的結果見表 2。 表 2顯示，4種消解 方 法 的 結 果 均 處 在 雞 肉 粉 標 準 物 質 砷 含 量0. 109± 0. 013mg/kg范圍內。 其中， 濕法消解結果接近于質控樣含量中位數， 干灰化法消解結果高于質控樣含量中位數， 微波消解和高壓消解結果低于質控樣含量中位數。
表 2 4 種消解方法結果準確度的比較
方法
均值 （mg/kg）
標準值 （mg/kg）
干灰化法
0.1207
0.109±0.013
濕法消解
0.1077
微波消解
0.0982
高壓消解
0.1008
3.2前處理方法對測定結果精密度的影響
4 種消解方法結果的精密度見表 3。 表 3 顯示， 濕法消解的 rsd 大，微波消解的 rsd 小，干灰化法和高壓消解法 rsd 值介于兩者之間。 結果表明， 微波消解平行樣品之間更加容易控制， 結果穩(wěn)定；濕法消解平行樣品之間不夠穩(wěn)定，較難控制。
4討論
gb/t5009.11-2003[1]中總砷的測定法是氫化物-原子熒光法， 該方法由于其突出的優(yōu)點， 是目前國內檢測食品中總砷含量使用廣泛的方法。gb/t5009.11-2003 中規(guī)定的樣品前處理方法是濕法消解和干灰化法，這兩種方法都是開放式消解，適用于各類食品中總砷含量的測定， 尤其是針對有機砷含量高的水產品類的檢測， 準確度和精密度均能達到理想要求[3，4]。 但濕法消解存在諸多弊端，例如，
前處理消耗時間長、效率低；酸量消耗特別大，產生
方法 消解體系 酸的種類及用量
（ml）
消解及趕酸時間
（h）
大量酸霧，污染實驗室環(huán)境，威脅實驗員健康；消化
干灰化法 硝酸鎂-氧化鎂 鹽酸：98 8 過程中加入高氯酸，增加爆炸的發(fā)生幾率；實驗過程
濕法消解 硝酸-硫酸-高
氯酸
硝酸：360 48
硫酸：8 高氯酸：16 鹽酸：50
還需專人看護，觀察溶液的顏色，防止碳化；各樣品間
的消化進度較難控制，平行樣之間精密度較差。
干灰化法消解溫度可達 550 ℃， 能破壞有機砷
微波消解 硝酸-過氧化氫 硝酸：56 5
過氧化氫：16 鹽酸：50
高壓消解 硝酸-過氧化氫 硝酸：56 8
過氧化氫：16 鹽酸：50
的穩(wěn)定結構， 所以得到的結果明顯偏高。 空白值對實
驗結果往往產生決定性影響， 干灰化法的試劑空白容易受到環(huán)境的影響， 尤其是加入的硝酸鎂和氧化鎂的純度，對結果有較大的影響。 因此，實驗操作
步驟需謹慎， 試劑純度也需達到要求。 該方法的優(yōu)
勢為操作過程簡單、用酸量少且種類單一，只需使用鹽酸，適合揮發(fā)溫度高或者油脂含量高的樣品，以免高溫造成待測元素的損失。
高壓消解法是一種密閉式增壓消解， 加熱方式是烘箱由外向內傳熱。 據報道，用高壓消解法檢測乳及乳制品中的砷含量及其他金屬元素， 各元素平行樣品間的精密度、加標回收率均符合測定要求[5-6]。 該法消解體系需要酸量較少、種類單一，對環(huán)境和檢測人員健康損害?。粌x器耗材成本較低，無需購置昂貴的儀器設備， 只需使用高溫烘箱和高壓罐， 且耐用；消解快速、*，準確度和精密均較好，可在樣品處理量較大的基層檢測機構廣泛使用。 該方法也存在一些弊端，例如，消解溫度一般不超過 200℃， 無法檢測砷存在形式復雜的樣品； 高壓消解罐存在一定的危險性，操作不當可能會引起爆炸；罐體較重， 實驗時需消耗大量的人力等。
微波消解與高壓消解法原理類似， 也是一種密閉式增壓消解，利用微波轉化為熱能，使樣品在高溫高壓 下與溶液反應至消解完畢， 且密閉系統(tǒng)也可以防止砷元素的揮發(fā)損失。 該法在肉及肉制品的檢測中已被證實為的前處理方法之一[7-10]。 微波消解法進行樣品前處理有許多優(yōu)勢，例如，儀器自動化程度高，前處理操作簡單，快速、安全；酸消耗量較少、種類單一；可進行大 批量處理，檢測結果準確，平行樣品間精密度好。 但該方法也存在一些局限性，例如，僅適用于處理砷存在形 式相對簡單的樣品，針對砷存在形式復雜的海產品，消 解溫度、酸的用量以及消解時間均無法破壞其中穩(wěn)定的砷化合物， 且購買
微波消解儀需要前期投入成本較大。
5結論
通過比較總砷測定的 4種前處理方法， 即干灰化法、濕法消解、微波消解、高壓消解，發(fā)現測定結果均處于雞肉粉標準樣品（0.109±0.013）mg/kg的范圍內， 相對標準偏差分別為 2.38% 、 6.53% 、 1.43% 和3.87%，其中濕法消解消耗酸量大、用時長，微波消解用時短。 每種方法各有其適用范圍， 應根據實驗室的儀器設備配置條件和樣品量進行選擇。若測肉品，
可優(yōu)先選擇高壓消解或微波消解。