紫葉稠李是優(yōu)良的園林綠化樹種。遼寧林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院林盛教學(xué)基地于2003年4月從北京植物園引人紫葉稠李，經(jīng)過引種觀察，樹體健壯，生長(zhǎng)速度較快，3a生樹高達(dá)2.5m，地徑2.8cm；抗寒性強(qiáng)，2003年1月和2005年1月園地氣溫達(dá)到-27.1℃和-29.0℃，無凍害發(fā)生；枝條密度是大，葉片卵狀長(zhǎng)橢圓形，長(zhǎng)度達(dá)12cm，尤其突出的是葉片在生長(zhǎng)季表現(xiàn)為深紫色，用做行道樹、庭蔭樹和園景點(diǎn)綴，具有較高的觀賞價(jià)值。張寶剛等對(duì)紫葉稠李進(jìn)行了芽接、枝接、扦插等方面的研究，取得了一定的成果…為了在短期內(nèi)獲得大量的紫葉稠李苗木。滿足綠化需求，筆者進(jìn)行了紫葉稠李的組織培養(yǎng)研究，為進(jìn)行工廠化育苗提供基本技術(shù)數(shù)據(jù)。
1、材料與方法
1.1材料來源
試驗(yàn)材料為遼寧林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院林盛教學(xué)基地從北京植物園引入的生長(zhǎng)良好、無病蟲害的紫葉稠李。
1.2外植體選用
取生長(zhǎng)健壯、無病蟲害的紫葉稠李冬眠枝或剛剛萌動(dòng)的枝條，切成帶有一個(gè)頂芽或側(cè)芽的莖段。
1.3外植體的滅菌處理
滅菌流程：小莖段一流水沖洗(30min)→洗滌荊溶液浸泡(10min)→流水沖洗(30min)→(以下工作在超凈工作臺(tái)完成)75％酒精浸泡30s→無菌水沖洗2次(1min1次)→0.1％hgcl2浸泡(8min)→無菌水沖洗6次(2min1次)。
1.4試驗(yàn)方法
1.4.1不同激素配比對(duì)紫葉稠李初代培養(yǎng)的影響?；九囵B(yǎng)基為ms+蔗糖30g/l+瓊脂6g/l(ph5.8)，其中加入不同質(zhì)量濃度的6-ba(設(shè)o.20、o.40、0.60、o.80、1.00mg/l質(zhì)量濃度梯度)和naa(設(shè)0.00、0.05、o.10mg/l一3個(gè)質(zhì)量濃度梯度)作為初代培養(yǎng)的脫分化培養(yǎng)基，然后將消毒處理后的莖段接種在其中進(jìn)行培養(yǎng)觀察。
1.4.2不同激素配比對(duì)紫葉稠李再生嫩莖增殖的影響。
將初代培養(yǎng)獲得的小植株除去葉片后再切成小莖段，接種到附加不同質(zhì)量濃度的6一ba(0.50、1.00、2.00mg/l)、naa(0.05、o.10、0.20mg/l)和ga3(0.00、0.50、1.00mg/l)的繼代分化培養(yǎng)基上(基本培養(yǎng)基同初代培養(yǎng)基)，4周后觀察增殖狀況，并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
1.4.3不同生長(zhǎng)素組合對(duì)紫葉稠李生根的影響。
以l/2ms+蔗糖20g/l+瓊脂7g/l(ph5.8)為基本培養(yǎng)基，其中加入不同質(zhì)量濃度的naa(0.00、0.10、0.50、1.00mg/l)和iba(o.00、0.10、o.50mg/l)作為生根培養(yǎng)基；將繼代培養(yǎng)得到的株高在1.5~2.0cm的嫩莖轉(zhuǎn)人生根培養(yǎng)基中。20d后觀察生根狀況，并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
以上培養(yǎng)基均在12l℃條件下滅菌20min。培養(yǎng)溫度為20±2℃，光照12h/d,光強(qiáng)為2000—3000lx。
1.4.4生根苗移栽。當(dāng)生根培養(yǎng)的小苗根長(zhǎng)為1.5—2.5cm時(shí)。開瓶在溫室煉苗7d，移栽前3d用50％可濕性多菌靈800倍液噴澆滅菌。試管苗移栽基質(zhì)為珍珠巖+泥炭土和蛭石+草炭土兩種，每種基質(zhì)中2種材料的體積比均為l：l。每種基質(zhì)移植小苗l000株。
2、結(jié)果與分析
2.1激素配比對(duì)紫葉稠李初代培養(yǎng)的影響
試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)。紫葉稠李頂芽和側(cè)芽的分化能力均較強(qiáng)，培養(yǎng)2周后逐漸分化出小植株。30d后部分小植株的葉腋處又分化出新的小植株。
由表l可知，不同激素配比對(duì)外植體的分化有顯著影響，在ms+6一ba1.00mg/l+naa0.10mg/l培養(yǎng)基中，小植株分化數(shù)量最少；而在ms+6一bao.60mg/l+naa0.1mg/l培養(yǎng)基中。小植株分化數(shù)量最多，質(zhì)量最好，分化率達(dá)到100.00％?？梢?，適宜的激素配比是誘導(dǎo)外植體分化的關(guān)鍵因素。
2.2激素配比對(duì)紫葉稠李再生嫩莖增殖的影響
由表2可知，增殖培養(yǎng)結(jié)果因激素配比不同而異，嫩莖增殖倍數(shù)隨細(xì)胞分裂素質(zhì)量濃度的增加而降低，以ms+6一ba0.50mg·l。1+naa0.05mg/l+ga30.50mg/l增殖倍數(shù)最高，達(dá)到8.17倍，且苗芽生長(zhǎng)健壯。
2.3不同生長(zhǎng)素組合對(duì)紫葉稠李生根的影響
由表3可知，以l/2ms+iba0.50mg/l培養(yǎng)基的生根效果最好，每個(gè)試管苗生根3—5條，長(zhǎng)度約1.5—2.5cm。生根率達(dá)到100％。
2.4基質(zhì)對(duì)紫葉稠李生根苗移栽的影響
在生根植株培養(yǎng)階段，對(duì)生長(zhǎng)健壯的生根苗進(jìn)行煉苗移栽。移栽后澆一次定根水。以后保持基質(zhì)濕潤(rùn)，溫度保持在20℃左右，初期適當(dāng)遮蔭。移栽后約15d的緩苗期過后，植株發(fā)出新根開始正常生長(zhǎng)。
試驗(yàn)所使用的2種混合基質(zhì)對(duì)移栽成活率的影響不顯著，但對(duì)小苗后期生長(zhǎng)速率有影響。移栽30d后統(tǒng)計(jì)珍珠巖+泥炭土和蛭石+草炭土的平均苗高分別為9.5cm和12.3cm。由此可見.蛭石+草炭土做移栽基質(zhì)更適合試管苗的生長(zhǎng)。
3、結(jié)論
在紫葉稠李組織培養(yǎng)過程中。6一ba與naa的配比對(duì)外植體的誘導(dǎo)具有顯著影響。在初代培養(yǎng)階段，ms+6-bao.60mg/l+naa0.05mg/l培養(yǎng)基對(duì)外植體的脫分化效果最好，分化率達(dá)到100.00％。在繼代增殖培養(yǎng)階段。ms+6一ba0.50mg/l+naa0.05mg/l+ga30.50mg/l培養(yǎng)基的增殖倍數(shù)最高，達(dá)到8.17倍，且苗芽生長(zhǎng)健壯。在生根培養(yǎng)時(shí)，l/2ms+iba0.50mg/l培養(yǎng)基的生根效果最好，生根率達(dá)到100％，且苗形美觀，色澤深綠，移栽后生長(zhǎng)旺盛。在移栽階段，在蛭石+草炭土(體積比為1：1)基質(zhì)中，移栽30d后平均苗高為12.3cm，有利于試管苗移栽的成活與后期生長(zhǎng)。