煙草的培養(yǎng)基，在植物組織培養(yǎng)時(shí)，通過調(diào)節(jié)iaa和ctk的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。
ctk/iaa高時(shí)，愈傷組織分化芽。ctk/iaa低時(shí)，分化根。ctk/iaa比例適中維持愈傷組織不分化。
愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基制備，以ms培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ),向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100ml,微量元素100×母液20ml,鐵鹽100×母液20ml,維生素100×母液20ml,肌醇200×母液10ml,*200×母液10ml,配制得ms培養(yǎng)基后，再加入0.5mg·l-1的ba8ml,0.5mg·l-1的naa8ml.然后加入實(shí)際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·l-1的naoh和0.5mol·l-1的hcl調(diào)整ph值至5.8-6.0.加入14g瓊脂，將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂*溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2l,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。
取一無菌培養(yǎng)皿，用*切取1-2片無菌苗葉片置于無菌培養(yǎng)皿中,并用*將葉片切成2mm2左右的小片，然后將其接種于準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基上,每瓶接種5小片，一共接種6瓶。接種后的三角平置于24條件下黑暗培養(yǎng)1周,然后在同樣溫度下有光照和全黑暗下培養(yǎng)3周直至愈傷組織形成（兩種情況各置3瓶）.觀察愈傷組織誘導(dǎo)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)愈傷組織誘導(dǎo)率。
器官分化及植株再生培養(yǎng)將誘導(dǎo)的愈傷組織按類型分別轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基上,置于連續(xù)光照，溫度20-22c條件下培養(yǎng)3周,統(tǒng)計(jì)愈傷組織再生植株情況。
煙草愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)4周后,愈傷組織基本形成，即排除因生長(zhǎng)時(shí)間不夠而未形成愈傷的情況。具體情況見表一中所示,6瓶培養(yǎng)物均有愈傷形成，且都未發(fā)生污染,但誘導(dǎo)率幾乎各不相同.其中，在光照條件下培養(yǎng)的3瓶平均愈傷誘導(dǎo)率為60.0℅，在黑暗條件下培養(yǎng)的3瓶平均愈傷誘導(dǎo)率為46.7%。由于實(shí)驗(yàn)過程中，外植體即煙草葉片取得偏小,接種時(shí)可能已有部分外植體的大部分細(xì)胞脫水死亡，使整個(gè)實(shí)驗(yàn)的愈傷組織誘導(dǎo)率偏低,愈傷塊偏小。