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四角瑞氏絳蟲探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法

發(fā)布時(shí)間:2024-10-08
四角瑞氏絳蟲探針法熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法:
1.ⅰ法:
在pcr反應(yīng)體系中,加入過量sybr熒光染料,sybr熒光染料特異性地?fù)饺雂na雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的sybr染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與pcr產(chǎn)物的增加*同步。
定量pcr擴(kuò)增熒光曲線圖
pcr產(chǎn)物熔解曲線圖
2.taqman探針法:
探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;pcr擴(kuò)增時(shí),taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,產(chǎn)品僅用于科研使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條dna鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與pcr產(chǎn)物的形成*同步。
所謂實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù),是指在pcr反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)pcr進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
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