介紹：納米藥物是設(shè)計更好的藥物遞送系統(tǒng)（dds）的一種有前景的方法，而基于細胞/組織的脂質(zhì)載體的開發(fā)是一種有前景的策略。在本研究中，作者提出了重組脂質(zhì)納米顆粒（rlnps）的概念，并提供了一種簡單的制備方法。結(jié)果表明，從細胞（小鼠乳腺癌癥細胞系，4t1）和組織（小鼠肝組織）中制備超小（~20nm）rlnp高度可再生。作為一個選定的模型平臺，來源于小鼠肝組織的rlnp可以進一步用成像分子（吲哚菁綠和xiang豆素6）標記，并用靶向配體（生物素）修飾。此外，rlnps被證明具有高度的生物相容性，能夠負載各種藥物，如鹽酸阿霉素（dox）和姜黃素（cur）。最重要的是，dox負載的rlnps（rlnp/dox）在體外和體內(nèi)都表現(xiàn)出良好的抗癌性能。因此，rlnps可能是構(gòu)建不同dds和治療多種疾病的潛在多功能載體。
制備：材料：
鹽酸阿霉素dox、姜黃素（cur）、xiang豆素（c6）、吲哚菁綠（igg）、甲基噻唑四氮唑（mtt）。dspe-peg2000-biotin（艾偉拓（上海）醫(yī)藥科技有限公司），其他沒有具體說明的化學品和試劑都是從阿拉丁購買，并且是分析級的。
艾偉拓avt在售的dspe-peg2000-biotin來自日本丘比的蛋黃卵磷脂，并且是以蛋黃粉為原料通過先進工藝提取、純化的磷脂混合物。
選擇好的磷脂產(chǎn)品可以來艾偉拓（上海）醫(yī)藥科技有限公司看一看，這是一家專營磷脂類gao端藥用輔料的科技公司，公司旗下產(chǎn)品豐富，有著技術(shù)專家的專業(yè)支持，能夠及時的解決客戶問題，助力客戶價值的提升。
rlnps的制備：
遵循先前報道的方案，從細胞和組織中提取全脂，并進行修飾。簡而言之，將100 mg的新鮮組織（或5x107的細胞）切成片，裝入500 µl 含有75%甲醇的玻璃均質(zhì)器中。在0℃下研磨約50次后，將混合物轉(zhuǎn)移到含有另1 ml甲基叔丁基醚（mtbe）的棕色試管中，將試管放入搖床中1小時，以便充分提取脂質(zhì)，然后，向管中加入250 µl純水，靜置10min進行相分離，然后在0℃下，15000xg離心15min，將含有濃縮脂質(zhì)的上部mtbe相轉(zhuǎn)移到另一個新的棕色試管中，并使用吹氮儀器進行干燥。
將得到的脂質(zhì)溶解在乙醇中，達到zhi定的濃度。然后，根據(jù)文獻作者之前的研究，采用溶劑擴散法，將乙醇溶液在攪拌（500rpm），以0.1 ml/s的恒定速率，通過注射器注入純水（體積比為：1：9）。
關(guān)于材料和方法的所有詳細信息請參考support information。
結(jié)果：
圖1：使用從4t1細胞和小鼠肝組織提取的脂質(zhì)制備的rlnp的尺寸分布（a，b）和形態(tài)觀察（c，d）。比例尺：200 nm。
圖2：4t1細胞中，未修飾（上）和生物素修飾（下）的c6標記rlnp的時間依賴性細胞攝取譜。比例尺：50μm
圖3：rlnps的生物相容性測定。（a）用不同濃度的rlnp處理1小時后2%紅細胞的溶血。插入的圖像顯示不同組的上清液。（b）小鼠的體重變化每隔一天靜脈注射rlnps（100mg/kg），持續(xù)14天。數(shù)據(jù)顯示為三個獨立結(jié)果的平均值和標準差。（c）從給藥結(jié)束時從受體獲得的主要器官制備的he組織病理學切片。比例尺：100μm。
圖4：rlnps的體內(nèi)腫瘤積聚測定。將游離icg（左）和icg標記的rlnp（右）靜脈注射到原位4t1荷瘤小鼠中，并通過實時成像觀察受試者在6（a）、24（b）和48小時（c）時的icg信號分布。在注射后48小時，切除一名受試者的主要器官和腫瘤組織進行離體成像（d）。（e） 靜脈內(nèi)給予游離dox和rlnp/dox（dox劑量：5mg/kg）后4t1荷瘤小鼠的時間依賴性組織/血漿dox濃度。dox濃度分別表示為組織的μg/g組織和血漿的μg/ml。數(shù)據(jù)顯示為三個獨立結(jié)果的平均值和標準差*p<0.05
圖6：rlnp/dox的體外抗癌性能。（a） 孵育24小時后，游離dox和rlnp/dox對4t1細胞的濃度依賴性細胞毒性。數(shù)據(jù)顯示為三個獨立結(jié)果的平均值和標準差。（b） mcts與游離dox或rlnp/dox（dox濃度：1μg/ml）孵育4天后的圖像。比例尺：500μm。左側(cè)的定量結(jié)果表示mcts的相應(yīng)體積
圖7：rlnp/dox的體內(nèi)抗癌性能。（a） 腫瘤體積變化和（b）he和ki67染色后的離體腫瘤切片的代表性圖像。比例尺：100μm*p＜0.05。
結(jié)論：總之，在本研究中，作者提出了rlnps的概念和制備方法，并展示了其作為多功能藥物遞送載體的潛力。它們的優(yōu)點包括：（1）從細胞和組織制備的重復性高；（2） 用熒光分子進行柔性標記，并對靶向配體和可能的其他功能部分進行修飾；（3） 高生物相容性；（4） 能夠裝載各種分子/藥物；以及（5）作為藥物載體具有良好的體外和體內(nèi)抗癌性能，這可以通過負載其他種類的藥物進一步擴展到治療其他疾病。在未來的工作中，作者將重點關(guān)注以下幾個方面：（1）將rlnps的應(yīng)用擴展到不同的藥物和其他疾病模型；（2） 探討rlnps是否具有細胞/組織特異性功能；和（3）闡明是否可以使用rlnp實現(xiàn)細胞/組織訓練，因為它們包含母體細胞/組織的脂質(zhì)組學。