sepdex g25是一種凝膠過濾介質(zhì),利用凝膠的孔徑大小,實現(xiàn)不同分子量的物質(zhì)的分離和純化。以葡聚糖為基質(zhì)的凝膠過濾層析介質(zhì)，其工作原理主要是利用具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的葡聚糖凝膠的分子篩作用，根據(jù)被分離樣品中各組分相對分子質(zhì)量大小的差異進行分離。
艾美捷sephadex g25，葡聚糖凝膠g-25：
目錄號：c-betb002
尺寸：
1.樹脂：10ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1l；
2.預(yù)包裝柱：5ml柱
儲存：20%乙醇或0.01m naoh，4-30°c
sephadex g25，葡聚糖凝膠g-25應(yīng)用實例：
色譜柱：xk16/30脫鹽柱，柱高25cm（sephadex g25m）。
平衡緩沖液：20mm pb+150mm nacl，ph 7.0，通過0.45μm過濾器過濾。
流速：2 ml/min。
柱平衡：將色譜柱連接到純化儀器上，用2-3柱體積（cv）的平衡緩沖液洗滌脫鹽柱。
樣品裝載：添加1 ml樣品，為了極大限度地延長色譜柱的使用壽命，樣品應(yīng)在裝載前進行澄清，例如以10000 g離心10分鐘或通過0.45μm過濾器過濾。洗脫：使用不超過建議zui大流速的流速，用平衡緩沖液洗滌脫鹽柱至少2 cv。
柱填料
1.凝膠懸浮液的制備
計算所需膨脹介質(zhì)的量（每1l柱床體積約1.15 kg沉淀凝膠）。例如，對于床高為10cm的16/20柱，膨脹介質(zhì)的所需量為
πx（1.6/2）2×10×1.15=23.11g。在干凈的燒杯中稱取23.11g介質(zhì)，并加入一定量（例如，12ml）的包裝溶液。攪拌形成均勻的凝膠懸浮液。
2.柱填料
2.1檢查色譜柱，確保所有成分完好無損、清潔。安裝底部玻璃料，擰緊o型環(huán)，并將立柱垂直固定在鐵支架上。使用水準儀檢查并調(diào)整立柱使其水平。
2.2向色譜柱中加入適量的填料溶液以除去空氣。擰上底部塞子，在柱中留下1-2cm的填充溶液。
2.3使用玻璃棒沿柱內(nèi)壁引導(dǎo)凝膠懸浮液，并連續(xù)傾倒，以最大限度地減少氣泡的產(chǎn)生。讓介質(zhì)自然沉淀，直到體積不再變化，此時，介質(zhì)和溶液將形成不同的層，上層完-全透明。
2.4將頂部玻璃料連接到低壓色譜系統(tǒng)，并以一定的流速啟動泵，以清除管道中的任何殘留空氣。暫停系統(tǒng)，將頂部玻璃料安裝到柱上，玻璃料的底端高于凝膠表面約1厘米。擰緊o形環(huán)并以300-500 cm/h的流速泵送色譜柱，直到床體積不再變化。繼續(xù)包裝5-10分鐘，并用記號筆標記凝膠表面的位置。
2.5暫停系統(tǒng)，擰上底部插頭，斷開立柱與泵的連接，向下旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)桿，使其停止在標記位置下方0-0.5 cm處。擰上頂部塞子以完成柱填料。
3.清潔和再生
就地清潔是為了去除變性蛋白質(zhì)、脂蛋白或脂質(zhì)。常用的清洗溶液包括0.2 m naoh或非離子洗滌劑，柱應(yīng)使用2-3 cv清洗。
4.儲存條件
室溫下儲存在20%乙醇或0.01m氫氧化鈉中。