色譜分離是利用混合物中各組分在兩相中分配系數(shù)不同，當流動相推動樣品中的組分通過固定相時，在兩相中進行的連續(xù)多次反復(fù)的分配，從而形成差速移動，達到分離目的的方法。
色譜分離技術(shù)是基于不同物質(zhì)在由固定相和流動相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù)，在采用流動相洗脫過程中呈現(xiàn)不同保留時間，從而實現(xiàn)分離。傳統(tǒng)色譜分離技術(shù)采用固定的色譜塔進行，*入一定量物料，然后采用洗脫劑不斷洗脫，在同一出口在不同時間段就可接到不同的產(chǎn)品組分，此過程費時費力。經(jīng)過分析并加以改進，把固定相的樹脂做成可以連續(xù)流動的系統(tǒng)，利用物質(zhì)與固定相的相對運動速度不同實現(xiàn)分離。把固定相比成一個傳送帶，分別比成快慢不同的兩組份，只要使固定相加上一個與洗脫方向相反的驅(qū)動力，使傳送帶運動速度處于速度中間，跑的快的比固定相快。從前頭得到，跑得慢的被傳送帶帶到后面得到。
色譜法簡單分為氣相色譜法、液相色譜法、超臨界流體色譜法。根據(jù)氣相和液相制備的不同，再分為填充柱色譜法、毛細管色譜法、經(jīng)典液相色譜柱法、液相色譜法、薄層色譜法、紫色普法、毛細管電泳法。無論怎么分類，都有共同的特點：凡是色譜分離都具有固定相和流動相；固定相是不動的，流動相相對于固定相做相對運動；被分離的組分與流動相和固定相都有不同的作用力。這種作用力有吸附力、溶解力、離子交換能力等。
根據(jù)分離原理還可將色譜法分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜、電泳色譜、氣相色譜等。利用物質(zhì)吸附能力不同進行分離的稱為吸附色譜，常用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、聚酰胺、活性炭、大孔吸附樹脂等。利用物質(zhì)在兩相不互溶的溶劑中的分配比不同進行分離的稱為分配色譜，常用的支持劑有硅膠、硅藻土、纖維粉等。液滴逆流色譜和高速逆流色譜則是在分配色譜與逆流分溶相結(jié)合的基礎(chǔ)上發(fā)展而成的一種新技術(shù)。利用物質(zhì)解離程度不同進行分離的稱為離子交換色譜，常用的離子交換樹脂有強酸型(磺酸型)、強堿型(季胺型)、弱酸型(羧酸型)、弱堿型(三級胺型)等。利用物質(zhì)分子大小不同進行分離的稱為凝膠色譜(亦稱分子篩或排阻色譜)，常用的支持劑有葡聚糖凝膠、羥丙基葡聚糖凝膠等。利用電流通過時，離子趨電性不同進行分離的稱為電泳色譜，常用的有紙電泳、瓊脂電泳、凝膠電泳等。